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    寵物犬血清新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)抗體的檢測報告----針對多地犬的血清檢測結果看新冠病毒是否感染犬
    2020/3/6 8:29:06    新聞來源:中國畜牧獸醫學會
     

    寵物犬血清新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)抗體的檢測報告

    ----針對多地犬的血清檢測結果看新冠病毒是否感染犬

    林德貴1,鄧均華2,田克恭3,蔣書東4,張潤5,霍家奇6

    1.中國農業大學動物醫學院,中國畜牧獸醫學會小動物醫學分會;2.洛陽普泰生物技術有限公司;3.國家獸用藥品工程技術研究中心;4.合肥天紅動物醫院;5.深圳維特動物醫院;6.武漢芭比堂動物醫院;

    新型冠狀病毒肺炎疫情下,人與動物的安全是我們當今社會的公共衛生大事之一。為了及時診斷家養寵物犬是否面臨新冠病毒的感染,我們啟動了寵物犬血清新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)抗體的檢測。本項目在國家權威的實驗室進行,采樣、運輸、保管、樣本處置、實驗室資質、檢測方法與操作,均符合國家的相關要求。

    1  技術原理

    采用雙抗原夾心ELISA反應原理,酶標板上包被SARS-CoV-2重組蛋白S1抗原,待檢樣品中的SARS-CoV-2特異性抗體與包被的重組蛋白S1抗原結合,加入含HRP標記SARS-CoV-2重組蛋白S1抗原的酶標試劑進行溫育。當樣品中存在SARS-CoV-2抗體時,不管是IgM還是IgG抗體,都將形成"包被抗原-抗體-酶標抗原"復合物,復合物上連接的HRP催化顯色劑反應,生成藍色產物,終止反應后變為黃色。若樣品中無SARS-CoV-2抗體,則不顯色。

    2材料

    2.1  臨床血清:深圳維特寵物醫院犬血清8份,安徽某寵物醫院犬血清9份,武漢某寵物醫院犬血清6份,??谀硨櫸镝t院4份。

    2.2  陽性血清:SARS-CoV-2重組蛋白S1抗原免疫犬血清,編號001,國家獸用藥品工程技術研究中心提供。

    2.3試劑盒:新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)雙抗原夾心ELISA抗體檢測試劑盒,批號:E22A2003S,洛陽普泰生物技術有限公司研發生產。

    3  試驗方法:

    3.1按照試劑盒說明書對不同來源的犬血清分別進行檢測。

    3.2試劑盒結果計算方法

    臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=0.16+陰性對照孔OD值均值(陰性對照孔OD值均值低于0.03者以0.03計算)。

    3.3試劑盒結果判定

    樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為SARS-CoV-2抗體陽性;樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為SARS-CoV-2抗體陰性。

    4試驗結果

    試劑盒檢測SARS-CoV-2重組蛋白S1抗原免疫犬血清為陽性,27份臨床犬血清均為陰性,詳見附表1。結果表明,不論是在新冠肺炎疫情最為嚴重的武漢,還是安徽、深圳、??诘纫咔檩p微的省份,寵物犬均未發生新冠病毒感染。

    抗體檢測是證明犬是否被新冠病毒感染的科學證據,抗體陰性科學地證明這些犬并未被新冠病毒感染;更加深入的第二階段擴大研究正在進行中。希望本研究結果對于我們正確認識當前疫情下的動物健康起到有益的幫助,尊重生命、相信科學。

    作者:202035日星期四于北京

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